Актуальность. Множественная миелома (ММ) - В-клеточная опухоль, характеризующаяся патологической пролиферацией B-клеток конечной стадии дифференцировки [1].
Важную роль в процессе созревания и дифференцировки миеломных клеток при ММ играют цитокины, являющиеся важнейшим регуляторным механизмом межклеточных взаимодействий между иммунной системой и опухолью [2].
В настоящее время известно, что многие цитокины - интерлейкины (ИЛ) - ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-8, фактор некроза опухоли (ФНО), альфа-интерферон - вырабатываются как лимфоцитами, так и опухолевыми клетками.
По механизму действия выделяют провоспалительные цитокины, которые обеспечивают мобилизацию воспалительного ответа (ИЛ-2, ИЛ-8, ФНО, альфа-интерферон), и противовоспалительные, ограничивающие развитие воспаления (ИЛ-4).
В частности ИЛ-8, способен проявлять себя как фактор усиления опухолевой прогрессии, ИЛ-2 необходим для пролиферации Т-клеток и других процессов, регулирующих тяжесть повреждения тканей, а ИЛ-4 подавляет активность макрофагов и снижает процесс биосинтеза провоспалительных цитокинов [3, 4].
Особенности цитокиновой регуляции влияют на иммунологическую защиту организма в целом. При гемобластозах наблюдается нарушения в иммунной системе [5], при хронических лейкозах так же регистрируются иммунные нарушения, приводящие к развитию осложнений, в том числе инфекционных [6]. При ММ среди осложнений инфекционные заболевания занимают второе место и встречаются у большинства больных.
Таким образом, можно предположить, что от баланса провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в крови больного человека зависит процесс прогрессирования заболевания и возможность возникновения инфекционных осложнений.
В связи с этим, целью данного исследования явилось изучение особенностей цитокиновой активности в прогрессировании заболевания у больных ММ-G формы.
Материалы и методы. Объектом исследования были 100 больных ММ G-формы, находившиеся в стационаре гематологического отделения «Красноярской Краевой клинической больницы №1» г. в 2011-2012 г. В качестве группы контроля было взято 100 практически здоровых людей, сопоставимых по возрасту и полу с группой больных.
Обследование больных и практически здоровых людей проводилось с разрешения этического комитета ФГБУ «НИИ медицинских проблем Севера» СО РАМН, при этом каждый участник подписывал форму информированного согласия на участие в исследовании.
Больных ММ разграничивали по стадиям заболевания согласно Международной классификации - International Staging System (ISS). Данная классификация основана на линейной зависимости между содержанием М - белка и клеточной опухолевой массой у больных.
При ММ II стадии происходит нарастание массы опухоли, характерны следующие показатели: уровень гемоглобина (Hb) - 85–100 г/л, IgG - 50–70 г/л. При ММ III стадии наблюдается увеличение массы опухоли, характерны гиперкальциемия, остеолитические процессы и следующие показатели: Hb <85 г/л, IgG >70 г/л.
Среди обследованных пациентов мужчин было – 38 человек (38 %), женщин - 62 (62%). Средний возраст мужчин составлял – 60 лет, от 47 до 73 лет, женщин – 61 год, от 43 до 76 лет (рис. 1).
Рис.1. Распределение больных по полу в зависимости от стадии заболевания при ММ.
Распределение больных по возрасту показало, что на II стадии заболевания находились 65% исследуемых больных, а на III стадии всего 35%, большинство больных были в возрасте 61-70 лет, что соответствует литературным данным (табл.1).
Таблица 1. Распределение больных по возрасту на разных стадиях заболевания при ММ
Всем больным венозная кровь бралась утром, натощак, из локтевой вены, при поступлении в стационар, до назначения патогенетической терапии.
Уровни ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-8, ФНО, альфа-интерферон в сыворотке крови больных и здоровых лиц определяли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа с использованием наборов реагентов производства ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск).
Статистическая обработка полученных данных проводилась в программе Statistica 8, которая включала подсчет медианы (Me) и персентилей (С25-С75). Статистическую значимость различий определяли по U-критерию Манна–Уитни. Результаты статистической обработки сведены в табл. 2.
Результаты. Изучение уровней цитокинов в сыворотке крови больных ММ – G формы и практически здоровых лиц позволило выявить достоверные различия по ряду показателей в исследуемых группах. Так, при ММ происходят изменения в концентрации всех исследуемых противовоспалительных и провоспалительных цитокинов (табл. 2).
Таблица 2. Цитокиновая регуляция клеток иммунной системы у больных ММ в зависимости от стадии заболевания
Примечания: р1 - статистически достоверные различия с величиной контрольных показателей; р2 - с величиной показателей больных ММ.
Уровни ФНО и альфа-интерферона при ММ достоверно повышены при III стадии заболевания относительно контроля.
При этом ФНО является многофункциональным провоспалительным цитокином, а альфа-интерферон - участвует в иммунном ответе организма на опухолевые клетки и оказывает противовирусное, иммуностимулирующее и антипролиферативное действие при внедрении вирусов и бактерий в организм человека.
ИЛ-2, провоспалительный цитокин, статистически достоверно увеличивается при II и III стадиях заболевания, при этом максимальное его содержание выявляется на последней стадии ММ.
Аналогичная тенденция регистрируется с ИЛ-8, который являясь самым ранним медиатором воспаления, мгновенно реагирует на внедрение инфекции в организм.
Уровень ИЛ-8 значительно повышен на II и III стадиях миеломной болезни, что свидетельствует о наличии воспалительных и инфекционных процессов в организме больного по мере прогрессирования заболевания.
С другой стороны, противовоспалительный цитокин ИЛ-4, который также регулирует рост и дифференциацию В-клеток, влияет на пролиферацию Т-клеток, резко снижается относительно контроля при прогрессировании ММ.
Минимальный уровень ИЛ-4 регистрируется на III стадии заболевания, статистически не различаясь от II стадии.
Таким образом, в целом в группе больных на II стадии уровни цитокинов ИЛ-2, ИЛ-8, были достоверно выше, а уровень ИЛ-4 ниже по сравнению с контролем.
В группе больных на III стадии ММ уровни ИЛ-2, ИЛ-8, ФНО, альфа-интерферон были достоверно выше, а ИЛ-4 ниже по сравнению с контролем.
Заключение. При прогрессировании ММ наблюдаются изменения в нормальном распределении цитокинов, что, вероятно, обуславливает возникновение иммунных нарушений, приводит к прогрессированию основного заболевания, появлению инфекционных осложнений.
При ММ наблюдается дисбаланс про- и противовоспалительных цитокинов, с преобладанием на всех стадиях заболевания провоспалительных и резким снижением противовоспалительных, что вероятно, не исключает их роль в стимуляции и роста самой опухоли.